程控定量封口机检测大肠菌群时应注意哪些？

随着国家对环境问题的日益重视，越来越多的检测设备和技术应用于水质检测中，其程控定量封口机检测大肠菌群以操作简便、检测时间短、结果可靠而被广泛应用。那么，我们在使用程控定量封口机时应注意哪些问题？下面我们一起看看。

采用酶底物法检测水中粪大肠菌群是将已加入培养基的水样混匀与97孔定量盘，置于44.5±0.5℃培养24h，粪大肠菌能在该温度产生β-半乳糖苷酶(β-D-galactosidase)，分解选择性培养基中的邻硝基苯-β-D-吡喃半乳糖(ONPG)生成黄色的邻硝基苯酚，通过定量盘大小孔显黄色数查询酶底物法的MPN表，计算出粪大肠菌群的浓度。但是我们在操作的过程中需要特别注意以下几点：

1、样品稀释的合理性

通过实验发现，采用酶底物法检测粪大肠菌群，水样稀释倍数越高，其测定的数值就越低，所以我们在日常检测工作中，应该根据具体的情况对水样进行逐一做小倍数的稀释，这样即可以确保检测结果的准确度，又可以提高数据的真实性。

2、样品的均匀性

我们在每次取原液时，取样的均匀度也会直接影响到后面的稀释结果，所以说在每次取样前需要充分摇匀，并尽快与培养基混合，否则会出现结果差异性很大，并且失去了该方法的稳定性。

3、温度培养的恒定性

使用酶底物法检测粪大肠菌群时，培养温度要按照要求设定，样品在培养箱中于44.5℃培养，误差控制在±0.5℃，温度偏低或偏高都会直接影响到检测结果。

4、培养时间的重要性

培养时间的长短也是会影响到检测结果的准确性，我们通过大量实验对比，发现使用酶底物法检测粪大肠菌群培养16~24h的检测结果与24h相比均有这明显的差异，而培养22~28h与24h结果差异不显著。因此，使用酶底物法检测总大肠菌群的培养时间应该在22~28h之间是可以得到准确的结果。

5、其他注意点：

（1）在使用该仪器时需要配合使用51孔/97孔定量检测盘；

（2）检测样品/试剂混合液需要分配到独立的孔中；

（3）51孔定量盘可检测每100mL水样中1-200MPN值。

（4）97孔定量盘可检测每100mL水样中1-2,419MPN值。

（5）整个检测过程手工操作时间小于1分钟。

以上就是为大家分享的关于程控定量封口机检测大肠菌群时需要注意的事项，希望可以帮助到大家！